RNAprep Pure Tissue Kit

Kuni 100 μg kogu RNA puhastamiseks loomkudedest.

RNAprep Pure Tissue Kit pakub kiiret, lihtsat ja kulutõhusat meetodit kogu RNA puhastamiseks looma kudedest, kasutades tõhusat tsentrifuugimist ja ainulaadset puhvrisüsteemi. Komplektis on RNaasivabad tsentrifuugikolonnid CR3 kvaliteetse RNA puhastamiseks ränidioksiid-membraanitehnoloogia abil. Kvaliteetse kogu RNA võib saada 40–50 minutiga kõrge puhtusastmega ning see ei sisalda valku ega genoomset DNA-d.

Kass Ei	Pakendi suurus
4992236	50 ettevalmistust

Saatke meile e -kiri

Toote üksikasjad

Eksperimentaalne näide

KKK

Toote sildid

Funktsioonid

■ Loomkudede jaoks optimeeritud puhvrid muudavad protsessi lihtsaks ja mugavaks.
■ Ainulaadne DNaas I minimeerib genoomse DNA saastumise.
■ Kõrgema puhtusastmega ja kasutusvalmis RNA sobib tundlikele allavoolu rakendustele.
■ Fenooli/kloroformi ekstraheerimine, LiCl ja etanooli sadestamine ning CsCl gradientide tsentrifuugimine pole vajalik, mis muudab protsessi ohutuks ja usaldusväärseks.

Rakendused

■ RT-PCR.
■ Northern Blot, Dot Blot.
■ Reaalajas PCR.
■ Kiipide analüüs.
■ PolyA sõelumine, in vitro translatsioon, RNaasi kaitseanalüüs ja molekulaarne kloonimine.

Kõiki tooteid saab kohandada ODM/OEM jaoks. Üksikasjade saamisekspalun klõpsake Kohandatud teenus (ODM/OEM)

Eelmine: RNAprep Pure Cell/Bakter Kit

Järgmine: RNAprep Pure FFPE komplekt

Materjal: 20 mg embrüot (13 päeva), 15 mg neeru, 10 mg maksa, 15 mg põrna, 10 mg tüümust, 20 mg kopsu
Meetod: Roti erinevatest koeproovidest saadud kogu RNA puhastati RNAprep Pure Tissue Kit abil.
Tulemused: Agaroosgeeli elektroforeesi pilt on näidatud ülal. Raja kohta laaditi 2-4 μl 100 μl eluaate.
M: TIANGEN DNA marker III;
Rada 1-2: embrüo (13 päeva); Rada 3: neer; Rada 4-6: maks; Rada 7: põrn; Rada 8: harknääre; Rada 9: kops.
Elektroforees viidi läbi 6 V/cm juures 30 minutit 1% agaroosgeelil.

K: Veeru blokeerimine

A-1 Rakkude lüüs või homogeniseerimine ei ole piisav

---- Vähendage proovide kasutamist, suurendage lüüsipuhvri kogust, suurendage homogeniseerimist ja lüüsi aega.

A-2 Proovi kogus on liiga suur

---- Vähendage kasutatud proovi kogust või suurendage lüüsipuhvri kogust.

K: Madal RNA saagis

A-1 Ebapiisav rakkude lüüs või homogeniseerimine

---- Vähendage proovide kasutamist, suurendage lüüsipuhvri kogust, suurendage homogeniseerimist ja lüüsi aega.

A-2 Proovi kogus on liiga suur

---- Palun vaadake maksimaalset töötlemisvõimsust.

A-3 RNA-d ei elueerita kolonnist täielikult

---- Pärast RNaasivaba vee lisamist jätke see enne tsentrifuugimist mõneks minutiks seisma.

A-4 Etanool eluendis

---- Pärast loputamist tsentrifuugige uuesti ja eemaldage pesupuhver nii palju kui võimalik.

A-5 Rakukultuuri sööde ei ole täielikult eemaldatud

---- Rakkude kogumisel eemaldage kindlasti sööde nii palju kui võimalik.

A-6 RNAstore'i salvestatud rakke ei tsentrifuugita tõhusalt

---- RNAstore tihedus on suurem kui keskmine rakukultuuri sööde; seega tuleks tsentrifugaaljõudu suurendada. Soovitatav on tsentrifuugida kiirusel 3000x g.

A-7 Madal RNA sisaldus ja arvukus proovis

---- Kasutage positiivset proovi, et teha kindlaks, kas proov on põhjustanud madala saagikuse.

K: RNA lagunemine

A-1 Materjal ei ole värske

---- Värsked koed tuleb kohe vedelas lämmastikus ladustada või kohe ekstraheerimise efekti tagamiseks RNAstore'i reaktiivi panna.

A-2 Proovi kogus on liiga suur

---- Vähendage proovi kogust.

A-3 RNaasi saastuminen

---- Kuigi komplekti kuuluv puhver ei sisalda RNaasi, on RNaasi saastamine ekstraheerimisprotsessi ajal lihtne ja seda tuleb käsitseda ettevaatlikult.

A-4 Elektroforeesi reostus

---- Asendage elektroforeesipuhver ja veenduge, et kulumaterjalid ja laadimispuhver ei oleks RNaasi saastunud.

A-5 Liiga palju koormust elektroforeesi jaoks

---- Vähendage proovide laadimist, iga süvendi koormus ei tohiks ületada 2 μg.

K: DNA saastumine

A-1 Proovi kogus on liiga suur

---- Vähendage proovi kogust.

A-2 Mõnel proovil on kõrge DNA sisaldus ja neid saab töödelda DNaasiga.

---- Tehke saadud RNA-lahusele RNaasivaba DNaasiga töötlemine ja RNA-d saab pärast töötlemist vahetult kasutada järgnevates katsetes või seda saab täiendavalt puhastada RNA puhastuskomplektidega.

K: Kuidas eemaldada RNaasi eksperimentaalsetest kulumaterjalidest ja klaasnõudest?

Klaasnõude jaoks, küpsetatud 150 ° C juures 4 tundi. Plastmahutite puhul sukeldatakse 10 minutiks 0,5 M NaOH-sse, seejärel loputatakse põhjalikult RNaasivaba veega ja steriliseeritakse RNaasi täielikuks eemaldamiseks. Katses kasutatud reaktiivid või lahused, eriti vesi, peavad olema RNaasivabad. Kõigi reagentide valmistamiseks kasutage RNaasivaba vett (lisage vett puhtale klaaspudelile, lisage DEPC lõppkontsentratsioonini 0,1% (V/V), loksutage üleöö ja autoklaavige).

Kirjutage oma sõnum siia ja saatke see meile