RNAprep Pure Cell/Bakter Kit

Kvaliteetse kogu RNA puhastamiseks rakkudest ja bakteritest.

RNAprep Pure Cell/Bacteria Kit pakub kiiret, lihtsat ja kulutõhusat meetodit kogu RNA puhastamiseks kultiveeritud rakkudest ja bakteriproovidest, kasutades tõhusat tsentrifuugimist ja ainulaadset puhvrisüsteemi. Komplekt sisaldab RNaasivaba keerutamiskolonni CR3 kõrgekvaliteedilise RNA puhastamiseks ränidioksiid-membraanitehnoloogia abil. Kõrge kvaliteediga täieliku RNA võib saada 30–40 minutiga kõrge puhtusastmega ning see ei sisalda valke ega genoomset DNA-d.

Kass Ei Pakendi suurus
4992235 50 ettevalmistust

Toote üksikasjad

Eksperimentaalne näide

KKK

Toote sildid

Funktsioonid

■ Kultiveeritud rakkude ja bakteriproovide jaoks optimeeritud puhvrid ja protokollid muudavad protsessi lihtsaks ja mugavaks.
■ Ainulaadne DNaas I minimeerib genoomse DNA saastumise.
■ Ainulaadsed RNaasivabad filtreerimiskolonnid CS kõrvaldavad muud saaste.
■ Kõrge puhtusastmega ja kasutusvalmis RNA sobib tundlikele allavoolu rakendustele.
■ Fenooli/kloroformi ekstraheerimine, LiCl ja etanooli sadestamine, CsCl gradiendi tsentrifuugimine pole vajalik, mis muudab protsessi ohutuks ja usaldusväärseks.

Rakendused

■ RT-PCR.
■ Northern Blot, Dot Blot.
■ Reaalajas PCR.
■ Kiipide analüüs.
■ PolyA sõelumine, in vitro translatsioon, RNaasi kaitseanalüüs ja molekulaarne kloonimine.

Kõiki tooteid saab kohandada ODM/OEM jaoks. Üksikasjade saamisekspalun klõpsake Kohandatud teenus (ODM/OEM)


  • Eelmine:
  • Järgmine:

  • product_certificate04 product_certificate01 product_certificate03 product_certificate02
    ×
    Experimental Example Materjal: inimese Jurkat rakud (1 × 106 )
    Meetod: Inimese Jukat rakkude kogu RNA eraldati, kasutades RNAprep Pure Cell/Bacteria Kit komplekti.
    Tulemused: vaadake ülaltoodud agaroosgeeli elektroforeesi pilti. Raja kohta laaditi 2-4 μl 50 μl eluaati. Elektroforees viidi läbi 6 V/cm juures 30 minutit 1% agaroosgeelil.
    Experimental Example Materjal: TOP10 E.coli (1 × 108)
    Meetod: TOP10 E.coli kogu RNA eraldati, kasutades RNAprep Pure Cell/Bacteria Kit komplekti.
    Tulemused: vaadake ülaltoodud agaroosgeeli elektroforeesi pilti. Raja kohta laaditi 2-4 μl 50 μl eluaati. Elektroforees viidi läbi 6 V/cm juures 30 minutit 1% agaroosgeelil.
    K: Veeru blokeerimine

    A-1 Rakkude lüüs või homogeniseerimine ei ole piisav

    ---- Vähendage proovide kasutamist, suurendage lüüsipuhvri kogust, suurendage homogeniseerimist ja lüüsi aega.

    A-2 Proovi kogus on liiga suur

    ---- Vähendage kasutatud proovi kogust või suurendage lüüsipuhvri kogust.

    K: Madal RNA saagis

    A-1 Ebapiisav rakkude lüüs või homogeniseerimine

    ---- Vähendage proovide kasutamist, suurendage lüüsipuhvri kogust, suurendage homogeniseerimist ja lüüsi aega.

    A-2 Proovi kogus on liiga suur

    ---- Palun vaadake maksimaalset töötlemisvõimsust.

    A-3 RNA-d ei elueerita kolonnist täielikult

    ---- Pärast RNaasivaba vee lisamist jätke see enne tsentrifuugimist mõneks minutiks seisma.

    A-4 Etanool eluendis

    ---- Pärast loputamist tsentrifuugige uuesti ja eemaldage pesupuhver nii palju kui võimalik.

    A-5 Rakukultuuri sööde ei ole täielikult eemaldatud

    ---- Rakkude kogumisel eemaldage kindlasti sööde nii palju kui võimalik.

    A-6 RNAstore'i salvestatud rakke ei tsentrifuugita tõhusalt

    ---- RNAstore tihedus on suurem kui keskmine rakukultuuri sööde; seega tuleks tsentrifugaaljõudu suurendada. Soovitatav on tsentrifuugida kiirusel 3000x g.

    A-7 Madal RNA sisaldus ja arvukus proovis

    ---- Kasutage positiivset proovi, et teha kindlaks, kas proov on põhjustanud madala saagikuse.

    K: RNA lagunemine

    A-1 Materjal ei ole värske

    ---- Värsked koed tuleb kohe vedelas lämmastikus ladustada või kohe ekstraheerimise efekti tagamiseks RNAstore'i reaktiivi panna.

    A-2 Proovi kogus on liiga suur

    ---- Vähendage proovi kogust.

    A-3 RNaasi saastuminen

    ---- Kuigi komplekti kuuluv puhver ei sisalda RNaasi, on RNaasi saastamine ekstraheerimisprotsessi ajal lihtne ja seda tuleb käsitseda ettevaatlikult.

    A-4 Elektroforeesi reostus

    ---- Asendage elektroforeesipuhver ja veenduge, et kulumaterjalid ja laadimispuhver ei oleks RNaasi saastunud.

    A-5 Liiga palju koormust elektroforeesi jaoks

    ---- Vähendage proovide laadimist, iga süvendi koormus ei tohiks ületada 2 μg.

    K: DNA saastumine

    A-1 Proovi kogus on liiga suur

    ---- Vähendage proovi kogust.

    A-2 Mõnel proovil on kõrge DNA sisaldus ja neid saab töödelda DNaasiga.

    ---- Tehke saadud RNA-lahusele RNaasivaba DNaasiga töötlemine ja RNA-d saab pärast töötlemist vahetult kasutada järgnevates katsetes või seda saab täiendavalt puhastada RNA puhastuskomplektidega.

    K: Kuidas eemaldada RNaasi eksperimentaalsetest kulumaterjalidest ja klaasnõudest?

    Klaasnõude jaoks, küpsetatud 150 ° C juures 4 tundi. Plastmahutite puhul sukeldatakse 10 minutiks 0,5 M NaOH-sse, seejärel loputatakse põhjalikult RNaasivaba veega ja steriliseeritakse RNaasi täielikuks eemaldamiseks. Katses kasutatud reaktiivid või lahused, eriti vesi, peavad olema RNaasivabad. Kõigi reagentide valmistamiseks kasutage RNaasivaba vett (lisage vett puhtale klaaspudelile, lisage DEPC lõppkontsentratsioonini 0,1% (V/V), loksutage üleöö ja autoklaavige).

    Kirjutage oma sõnum siia ja saatke see meile