RNAsimple Total RNA komplekt

Suure efektiivsusega kogu RNA ekstraheerimiseks, kasutades laialdaselt kasutatavat tsentrifugaalkolonni.

RNAsimple Total RNA komplekt võtab kasutusele uue RNA ekstraheerimismeetodi, mis põhineb guanidiiniumisotiotsüanaadi/fenooli meetodil. TIANGENi spetsiaalselt loodud puhver RZ võib kiiresti ja tõhusalt eemaldada rakkudest genoomse DNA ja valgud, muutes saadud RNA väga puhtaks ja stabiilseks.
Seda komplekti kasutatakse kogu RNA eraldamiseks verest, loomarakkudest, kudedest ja taimekoest. Iga tsentrifuugimiskolonn võib töödelda 50–100 mg koe või 5 × 106rakke korraga ja suudab korraga töödelda suurt hulka erinevaid proove. Reaktsiooni saab lõpule viia vähem kui ühe tunni jooksul ja ekstraheeritud kogu RNA -l on suurem saagikus, parem puhtus, DNA ja valkude saastumine puudub ning seda saab kasutada erinevates allavoolu katsetes.

Kass Ei Pakendi suurus
4992858 50 ettevalmistust

Toote üksikasjad

Töövoog

Eksperimentaalne näide

KKK

Toote sildid

Funktsioonid

■ Kõrge puhtusastmega kasutusvalmis RNA sobib tundlikele allavoolu rakendustele.
■ Laiad rakendused: puhastatud RNA -d saab rakendada erinevatele katselistele proovidele.
■ Katse saab lihtsate toimingutega 1 tunniga lõpule viia.

Rakendused

■ RT-PCR
■ Northern Blot, Dot Blot.
■ Reaalajas PCR
■ PolyA sõelumine, in vitro translatsioon, RNaasi kaitseanalüüs, molekulaarne kloonimine.

Kõiki tooteid saab kohandada ODM/OEM jaoks. Üksikasjade saamisekspalun klõpsake Kohandatud teenus (ODM/OEM)


  • Eelmine:
  • Järgmine:

  • product_certificate04 product_certificate01 product_certificate03 product_certificate02
    ×

    Workflow

    Experimental Example Materjal: 20 mg roti põrnakudet
    Meetod: Roti põrnakoe kogu RNA eraldati, kasutades RNAsimple Total RNA komplekti.
    Tulemused: vaadake ülaltoodud agaroosgeeli elektroforeesi pilti. Raja kohta laaditi 2-4 μl 100 μl eluaate. Elektroforees viidi läbi 1 minuti agaroosil 30 minutit kiirusel 6 V/cm.
    K: Veeru blokeerimine

    A-1 Rakkude lüüs või homogeniseerimine ei ole piisav

    ---- Vähendage proovide kasutamist, suurendage lüüsipuhvri kogust, suurendage homogeniseerimist ja lüüsi aega.

    A-2 Proovi kogus on liiga suur

    ---- Vähendage kasutatud proovi kogust või suurendage lüüsipuhvri kogust.

    K: Madal RNA saagis

    A-1 Ebapiisav rakkude lüüs või homogeniseerimine

    ---- Vähendage proovide kasutamist, suurendage lüüsipuhvri kogust, suurendage homogeniseerimist ja lüüsi aega.

    A-2 Proovi kogus on liiga suur

    ---- Palun vaadake maksimaalset töötlemisvõimsust.

    A-3 RNA-d ei elueerita kolonnist täielikult

    ---- Pärast RNaasivaba vee lisamist jätke see enne tsentrifuugimist mõneks minutiks seisma.

    A-4 Etanool eluendis

    ---- Pärast loputamist tsentrifuugige uuesti ja eemaldage pesupuhver nii palju kui võimalik.

    A-5 Rakukultuuri sööde ei ole täielikult eemaldatud

    ---- Rakkude kogumisel eemaldage kindlasti sööde nii palju kui võimalik.

    A-6 RNAstore'i salvestatud rakke ei tsentrifuugita tõhusalt

    ---- RNAstore tihedus on suurem kui keskmine rakukultuuri sööde; seega tuleks tsentrifugaaljõudu suurendada. Soovitatav on tsentrifuugida kiirusel 3000x g.

    A-7 Madal RNA sisaldus ja arvukus proovis

    ---- Kasutage positiivset proovi, et teha kindlaks, kas proov on põhjustanud madala saagikuse.

    K: RNA lagunemine

    A-1 Materjal ei ole värske

    ---- Värsked koed tuleb kohe vedelas lämmastikus ladustada või kohe ekstraheerimise efekti tagamiseks RNAstore'i reaktiivi panna.

    A-2 Proovi kogus on liiga suur

    ---- Vähendage proovi kogust.

    A-3 RNaasi saastuminen

    ---- Kuigi komplekti kuuluv puhver ei sisalda RNaasi, on RNaasi saastamine ekstraheerimisprotsessi ajal lihtne ja seda tuleb käsitseda ettevaatlikult.

    A-4 Elektroforeesi reostus

    ---- Asendage elektroforeesipuhver ja veenduge, et kulumaterjalid ja laadimispuhver ei oleks RNaasi saastunud.

    A-5 Liiga palju koormust elektroforeesi jaoks

    ---- Vähendage proovide laadimist, iga süvendi koormus ei tohiks ületada 2 μg.

    K: DNA saastumine

    A-1 Proovi kogus on liiga suur

    ---- Vähendage proovi kogust.

    A-2 Mõnel proovil on kõrge DNA sisaldus ja neid saab töödelda DNaasiga.

    ---- Tehke saadud RNA-lahusele RNaasivaba DNaasiga töötlemine ja RNA-d saab pärast töötlemist vahetult kasutada järgnevates katsetes või seda saab täiendavalt puhastada RNA puhastuskomplektidega.

    K: Kuidas eemaldada RNaasi eksperimentaalsetest kulumaterjalidest ja klaasnõudest?

    Klaasnõude jaoks, küpsetatud 150 ° C juures 4 tundi. Plastmahutite puhul sukeldatakse 10 minutiks 0,5 M NaOH-sse, seejärel loputatakse põhjalikult RNaasivaba veega ja steriliseeritakse RNaasi täielikuks eemaldamiseks. Katses kasutatud reaktiivid või lahused, eriti vesi, peavad olema RNaasivabad. Kõigi reagentide valmistamiseks kasutage RNaasivaba vett (lisage vett puhtale klaaspudelile, lisage DEPC lõppkontsentratsioonini 0,1% (V/V), loksutage üleöö ja autoklaavige).

    Kirjutage oma sõnum siia ja saatke see meile